Ausência de efeito do análogo (hCG) do hormônio luteinizante na angiogênese luteal em ratas (Rattus novergicus) / Faillure in the effect of the analogue (hCG) of luteinizing hormone on the luteal angiogenesis in rats (Rattus novergicus)

A compreensão dos mecanismos de controle da atividade ovariana é necessária para o sucesso das biotecnologias da reprodução. Embora existam inúmeros trabalhos a respeito da aplicação do hormônio luteinizante (LH) na função ovariana, pouco se sabe sobre a sua influência na morfologia e formação da vasculatura do corpo lúteo (CL). Diante disto, o presente projeto teve como objetivo a quantificação da densidade vascular dos CLs de animais tratados com Gonadotrofina Corionica Humana (hCG) após a ovulação. Para tanto, foram utilizados ratas wistar, cujos CLs foram divididos em dois grupos: (A) tratado com hCG na manhã seguinte a cópula e (B) controle (solução fisiológica a 0,9 % de NaCl). Foram confeccionadas lâminas dos ovários dos animais para a quantificação da densidade vascular. Os resultados obtidos não revelaram diferenças significantes entre a densidade vascular dos grupos tratado e controle.

The knowledge of the mechanisms that affect the control of the ovarian activity is essential for the success of reproduction biotechnologies. Although a number of studies have been carried out in which the luteinizing hormone (LH) was used to control the ovarian activity, little is known about its influence in the morphology and vascular formation of the corpus luteum, aiming to increase the local blood flow. Thus, the objective of the present experiment was the quantification of the vascular density of corpora lutea (Cls) in animals treated with human chorionic gonadotropin (hCG) just after ovulation. Therefore, eighteen wistar rats were used in this experiment . Eight rats in the treated group and ten rats in the control group. Corpora lutea were divided into two groups: group (A) treated with hCG in the following morning after copulation, and group (B) control animals which received an injection of 0.9% sodium chloride solution. Ovaries from each group were used for preparation of histological sections for vascular density qualification. No statistical significance was found between the two groups tested.

Efeito da adição de glutationa na função e estresse oxidativo em sêmen ovino criopreservado / Effect of glutathione on the function and oxidative status of ovine cryopreserved sperm

Os ácidos graxos poli-insaturados garantem fluidez à membrana plasmática do espermatozoide. No entanto, as duplas ligações presentes, os tornam mais susceptíveis aos efeitos nocivos da peroxidação lipídica. A adição do antioxidante Glutationa reduzida (GSH) poderia conferir proteção aos espermatozoides de ovinos submetidos à congelação contra os graves danos causados pelo estresse oxidativo. O objetivo do presente experimento foi avaliar se a GSH protege os espermatozoides ovinos criopreservados contra danos causados pelo estresse oxidativo. Foram colhidos ejaculados de quatro carneiros adultos. As análises convencionais foram: concentração, motilidade, vigor e morfologia. As análises funcionais foram: integridade de membrana, integridade acrossomal, integridade de cromatina e atividade mitocondrial. O sêmen foi criopreservado utilizando o diluidor Tris-gema-critrato, suplementado com GSH (controle, 1, 5 e 10 mM). As amostras foram submetidas ao protocolo de peroxidação lipídica induzida e subsequente quantificação das substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS). As análises estatísticas foram realizadas utilizando o Sistema SAS para Windows. Não houve efeito do tratamento com GSH sobre as variáveis avaliadas pelos testes convencionais. A GSH diminuiu a proporção de acrossomas íntegros. Amostras tratadas com 5mM de GSH apresentaram menor percentual de células com membranas íntegras quando comparadas às amostras controle e aquelas tratadas com 10 mM; o percentual de células sem atividade mitocondrial foi influenciado pela GSH e também não houve efeito nas TBARS. As amostras do grupo controle foram mais susceptíveis à denaturação da cromatina. Em conclusão, a adição do antioxidante Glutationa reduzida confere proteção ao DNA e à atividade mitocondrial de espermatozoides de ovinos.

The high susceptibility of sperm to the oxidative stress occurs especially due to high content of poly-unsaturated fatty acids (PUFAs) in its plasma membrane. The PUFAs provide the necessary fluidity to the plasma membrane. However double bonds present in those fatty acids are more susceptible to oxidative stress. Studies in human indicate that cryopreservation may lead to damages to the sperm due to oxidative stress. This study aimed to verify if the antioxidant glutathione (GSH) may protect ovine cryopreserved sperm against damages caused by oxidative stress. Semen samples of four rams were cryopreserved using Tris-egg yolk extender supplemented with different concentrations of reduced glutathione (control, 1, 5 and 10 mM). After thawing, samples were evaluated using conventional (motility and vigor) and functional tests (membrane integrity and mitochondrial activity). Aliquots of each thawed sample were submitted to protocol of induced lipid peroxidation using ascorbate (20 mM) and ferrous sulphate (4 mM), with further measurement of tiobarbituric acid reactive substances (TBARS), index of oxidative stress. No effect of GSH was observed on variables assessed by conventional tests. GSH decreased the proportion of intact acrosomes. Samples treated with 5 mM GSH showed lower percentage of intact membrane cells when compared to control samples and those treated with 10 mM. The percentage of cells with mitochondrial activity was affected by GSH, but no effect on TBARS. Samples from control group were more susceptible to denaturation of chromatin. In conclusion, the addition of Glutathione (GSH) offers protection to DNA and mitochondrial activity of ovine sperm.

Utilização do método Famacha no diagnóstico clínico individual de haemoncose em ovinos no Sudoeste do Estado de Minas Gerais / Utilization of the Famacha method in individual clinic diagnostic of haemonchosis in sheep of south-west of Minas Gerais State

O objetivo deste estudo foi observar a eficácia do método Famacha no diagnóstico clínico individual de haemoncose em ovinos provenientes do Sudoeste de Minas Gerais. Cinquenta ovelhas mestiças Santa Inês foram avaliadas durante 5 meses quanto à coloração da mucosa conjuntiva (método Famacha), volume globular (VG), ovos por grama de fezes (OPG), escore corporal e alterações clínicas. O escore Famacha observado variou de 1 a 3; o escore corporal de 2 a 5; o VG de 20 a 47 por cento; e o OPG de 0 a 7.750. As correlações entre os parâmetros avaliados, exceto Famacha com escore corporal, foram altamente significativas (P < 0,0001). O principal gênero identificado nas coproculturas foi Haemonchus (87 a 100 por cento do total de larvas, ± 93,5 por cento). Constatou-se redução de 87,33 por cento na utilização de anti-helmínticos na propriedade. Conclui-se que o método Famacha, associado a outros métodos de diagnóstico, é ferramenta útil na detecção da haemoncose em ovinos.

The aim of this study was to evaluate the efficacy of Famacha method in individual clinical diagnosis of haemonchosis in sheep from the south-west of Minas Gerais. Fifty crossbred Santa Inês ewes were evaluated during 5 months as for conjunctival mucous colour (Famacha method), Packed Cell Volume (PCV), Faecal Egg Counts (FEC), body score and clinic alterations. The score Famacha observed was from 1 to 3, the body score from 2 to 5, the PCV from 20 to 47 percent, and FEC from 0 to 7,750. The correlations between the parameters evaluated, except Famacha with body score, were highly significant (P < 0.0001). The main genus identified in the coprocultures was Haemonchus (87 - 100 percent of total larvae, ± 93.5 percent). We observed reduction of 87.33 percent in the use of anthelmintics on the property. It was concluded that the Famacha method, associated with other diagnostic methods, is a useful tool to detect hemonchosis in sheep.

Effect of insemination-to-induced ovulation interval on fertilization rate, embryo viability and number of accessory sperms in SOWS

The ideal interval between AI and ovulation (OV) is not well determined yet, varying from 12 to 28 h before up to 4 h after ovulation. Utilization of gonadotrophins to synchronize ovulation would allow the pre-determination of the groups' size, according to the AI-OV intervals, and would contribute to determine a secure interval between AI-Ov. 120 sows received 7.5 mg IM of Luprostiol, between days 12 and 17 of the estrous cycle, 600 lU of eCG 1M 24 h after prostaglandin and 5.0 mg of LH 1M 72 h after eCG injection. The moment of ovulation was diagnosed by transrectal ultrasonography at intervals of 6 h. There were 5 treatments according to IA-OV interval: T1- 48 to 36 h before OV; T2- 36 to 24 h before OV; T3- 24 to 12 h before OV; T4- 12 to 0h before OV and T5-0 to 12 h after Ov. Sows were slaughtered 96. 7±11.37 h after Ov. Recovery rate (RR), number of corpora lutea (NC), total number of structures (ST), fertilization rate (FR), embryo viability (EV) and number of accessory sperm (AS) were analyzed. The synchronization protocol showed an homogenous distribution of the animaIs among treatments (LH-OV interval 39.22±7.6h), and it didn't influenced the results. FR and EV results suggest that 36 h is the time of sperm viability in sow genital tract. There was a strong decline of AS between T3 and T4.

O intervalo ideal entre a AI e ovulação (OV) não está bem determinado ainda, variando entre 12 a 28 h antes até 4 h depois da ovulação. A utilização de gonadotrofinas para sincronizar ovulação permitiria a pré-determinação do tamanho dos grupos, de acordo com os intervalos IA-OV, e possibilitaria determinar um intervalo seguro entre IA-OV 120 porcas receberam 7.5 mg IM de Luprostiol, entre os dias 12 e 17 do ciclo estral, 600 lU de eCG 1M 24 h após o Luprostiol e 5.0 mg de LH 1M 72 h após a injeção de eCG. O momento de ovulação foi diagnosticado pela ultra-sonografia trans-retal a intervalos de 6 h. Definiu-se 5 tratamentos de acordo com o intervalo IA-OV: T1 - 48 a 36 h antes da OV; T2 - 36 a 24 h antes da OV; T3 - 24 a 12 h antes da OV; T4 -12 a 0 h antes da OV e T5 - 0 a 12 h após a OV. O abate ocorreu 96.7±11.37 h após a OV. A taxa de recuperação (RR), número de lutea de corpos (NC), número total de estruturas (ST), taxa de fecundação (FR), viabilidade embrionária (EV) e número de espermatozóides acessórios (AS) foram analisados. O protocolo de sincronização mostrou uma distribuição homogênea dos animais entre os tratamentos (intervalo LH-OV de 39.22±7.6h), e não influenciou os resultados. A FR e os resultados de EV sugerem que 36 h seja o tempo de viabilidade do espermatozóide trato genital da porca. Houve um forte declínio do AS entre T3 e T4.

Avaliação do uso de Hormônio Luteinizante (LH) como indutor da ovulação em porcas / Assessment of the Luteinizing Hormon (LH) use in ovulation induction in sows

A pesquisa, desenvolvida num sistema de produção de suínos, estudou a efetividade do hormônio luteinizante (LH) na indução das ovulações. Vinte e quatro fêmeas constituíram o grupo controle e trinta e duas receberam a injeção intramuscular de 600 UI de eCG (Novormon 5000®), 24 h após a desmama e 5 mg de LH (Lutropin - V ®), 56 h após a injeção de eCG, caracterizando o grupo tratado. O estro foi observado 2 vezes ao dia, a ovulação detectada por ultra-sonografia transcutânea e taxa de ovulação (TO) determinada por contagem de corpos lúteos. O intervalo desmama-estro (IDE) foi reduzido (P = 0,01) pelo tratamento (87,4 vs 98,5 horas). As ovulações ocorreram entre 32 e 48 h (37,25 ± 3,65) após LH e foi diferente (P < 0,0001) do controle (63,67 ± 20,22, variando de 32 a 104 h). A TO do tratamento foi semelhante (P = 0,2) à do controle (23,16 ± 12,19 vs 20,08 ± 5,19, respectivamente).

Unica ou dupla inseminação artificial em tempo fixo em porcas com ovulações induzidas pelo Hormônio Luteinizante / Single or double artificial insemination in fixed time in sows with ovulation induced by Luteinizing Hormon

Duzentas e cinqüenta e quatro matrizes Camborough 22 (PIC®), foram divididas em 3 tratamentos: T 1 (n=60) - 600 UI de eCG após desmama e 5 mg de LH, 72 h após eCG , com única inseminação artificial (IA) (24 h após LH); T 2 (n=95) - mesmo tratamento hormonal do T1, com 2 IA (24 e 32 h após LH); T 3 (n=99) - grupo controle sem tratamento hormonal, com 3 IA. As médias de intervalo desmame-estro (IDE) em T1, T2 e T3 foram de 87,4 ± 3,0 (87 a 111), 87 ± 0 (87) e 99,9 ± 13,6 (63 a 135) horas, respectivamente, sendo reduzidas (P < 0,0001) pelas gonadotrofinas. A duração do estro (DE) foi de 44,3 ± 8,78 (12 a 60), 41,3 ± 9,77 (24 a 60) e 60,1 ± 10,22 (36 a 84) horas, respectivamente para T1, T2 e T3, sendo menor (P < 0,0001) nas fêmeas tratadas. As diferenças no intervalo LH e ovulação (LH-OV) entre o grupo controle (56,1 ± 15,91, variação de 21 a 93 horas) e os grupos tratados (35,7 ± 6,07 em T1 e 35,5 ± 6,06 em T2, com variação de 30 a 42 horas) foram significativas (P < 0,0001). O tamanho de leitegada (TL) foi de 10,6 ± 3,25 (2 a 16) em T1, 11,3 ± 3,0 (4 a 20) em T2 e 11,6 ± 2,74 (4 a 18) leitões em T3, enquanto os mesmos demonstraram número de leitões nascidos vivos (NV) de 9,6 ± 3,14 (2 a 16), 10,5 ± 2,83 (1 a 18) e 10,5 ± 2,73 (4 a 16) leitões. Tanto em TL (P = 0,11) quanto em NV (P = 0,06) não houve diferença. A significante taxa de parição (TP) no T1, T2 e T3 foi, respectivamente, 76,67 por cento, 88,42 por cento e 91,92 por cento, diferindo entre T1 e T3 (P = 0,01). As gonadotrofinas foram efetivas na indução e sincronização das ovulações; o uso de 2 IAs manteve os índices reprodutivos e, embora a IA única não revele significância quanto ao menor valor de TL, há necessidade de serem realizados novos estudos nesta área.

Comparaçäo dos índices reprodutivos com inseminaçäo artificial ou cobertura natural sob influências sazonais em suínos / Comparative reproductive rates using artificial insemination and natural mating under seasonal influences in swine

Os resultados das taxas de fertilidade e dos tamanhos das leitegadas foram analisados na granja de suínos da Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia da Universidade de Säo Paulo no Campus de Pirassununga, durante o período de 4 anos (1992 a 1995), com o objetivo de comparar a inseminaçäo artificial (IA) e a cobertura natural (CN) em diferentes épocas do ano, procurando estudar as influências sazonais sobre os índices reprodutivos. Foram avaliadas 799 coberturas em fêmeas das raças Landrace (L), Large White (LW) e mestiças, sendo 539 de IA e 260 de CN. Reprodutores (L e LW) de comprovada fertilidade foram utilizados tanto para CN quanto para IA. As doses de sêmen apresentavam concentraçäo mínima de 3 bilhöes de espermatozóides em volume de 100 ml. As IA foram realizadas às 12 e às 24 horas após reflexo positivo de tolerância ao macho, enquanto as montas foram realizadas no momento e às 24 horas após o diagnóstico do cio. Os índices de fertilidade foram de 72,9 por cento e 75,8 por cento e o número de leitoes nascidos de 12,4 e 12,1, respectivamente, para inseminaçäo artificial e monta natural, näo mostrando diferença significativa. A estaçäo climática influenciou a taxa de pariçäo (71,2 por cento, 81,4 por cento, 76,9 por cento e 66,4 por cento, para veräo, outono, inverno e primavera, respectivamente; p < 0,05), mas näo mostrou efeito sobre o tamanho da leitegada. Näo houve influência do tipo de cobertura (IA ou CN) e da interaçäo entre estaçäo climática e tipo de cobertura sobre as taxas de pariçöes e os tamanhos das leitegadas. As médias de temperatura máxima e mínima se correlacionaram negativamente com a taxa de pariçäo

Relações entre as características intervalo desmame-cio, duração do cio e momento da ovulação diagnosticado pela ultra-sonografia em fêmeas da espécie suína / Relationships between the characteristics weaning-to-estrus interval, estrus duration and moment of ovulation by ultrasonography in sows

Estudaram-se as relações entre o intervalo desmame-cio (IDC), a duração do cio (DC) e o momento da ovulação (MO). Foram observadas 236 fêmeas para a obtenção dos dados de IDC e DC, as quais eram testadas para o diagnóstico de cio 4 vezes ao dia, na presença do macho. A ovulação foi diagnosticada em 77 fêmeas, pela ultra-sonografia, por via transcutânea, em 3 exames diários com 8 horas de intervalo. Houve correlação negativa entre intervalo desmame-cio e duração do cio (r=-0,4657; p=0,0001) e entre intervalo desmame-cio e momento da ovulação (r=-0,3955; p=0,0004), no entanto, não houve correlação entre duração do cio e momento da ovulação (r=0,2201; p=0,0578). A porcentagem de fêmeas que ovularam entre 0 e 24, 24 e 48, 48 e 72 e acima de 72 horas após o início do cio foi de, respectivamente, 0 por cento, 58,4 por cento, 37,5 por cento e 4,2 por cento para o IDC de 3 dias, 3,2 por cento, 67,7 por cento, 29,2 por cento e 0 por cento para o IDC de 4 dias, 0 por cento, 91,6 por cento, 8,3 por cento e 0 por cento para o IDC de 5 dias e 10 por cento, 90 por cento, 0 por cento e 0 por cento para o IDC de 6 e 7 dias. Nestas condições, o IDC não se mostrou uma referência confiável para ser utilizado como um preditor do momento ideal da inseminação. No entanto, o conhecimento das características IDC, DC e MO dentro de cada rebanho ajuda a apontar falhas e elaborar programas eficientes de IA.